制備色譜柱的維護方法
The maintenance of the preparation of chromatographic column
一、建議使用保護柱，避免顆粒進入色譜柱，引起堵塞；
二、建議選擇合適pH范圍的色譜柱，避免填料溶劑老化；
三、緩沖鹽的正確使用：
緩沖鹽通常使用不當會析出，堵塞篩板和填料，使填料板結，柱壓升高，阻礙基質上鍵合相的碳鏈自由舒展，使色譜柱保留能力下降，柱效降低，縮短其使用壽命，緩沖鹽析出后很難去除，因此正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱的使用壽命非常重要，具體方法如下：
“使用前過渡，使用后沖洗！”
1）等度條件：制備前后用過渡流動相沖洗柱體積不少于20-30個柱體積，或制備完成后用過渡流動相以1.0mL/min（根據柱規格調整）沖洗過夜；
2）梯度條件：制備前，用與初始流動相組成相同的流動相以工作流速沖洗色譜柱不少于20-30個柱體積，制備后，用該過渡流動相沖洗色譜柱不少于20-30個柱體積，且梯度盡量平緩，避免緩沖鹽析出；
3）過渡流動相：有機相和水相的比例和分析流動相中兩相比例一致，或者水相比例高于分析流動相，*不含緩沖鹽；
四、避免強保留物質在色譜柱保留：
強保留物質在色譜柱中的累積是一個緩慢的過程，引起峰變寬和拖尾，使柱效下降，保留時間變化，柱壓長高；對復雜樣品很難判斷其是否含有強保留物質，因此要預防這一切的方式，堅持每天分析完成后用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上。
清洗方法：
1）未使用緩沖鹽，每天使用完成后用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上；
2）使用緩沖鹽，用上述方法去除緩沖鹽后，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱20個柱體積以上；
3）補救方法：水→乙腈→異丙醇（或氯坊）→乙腈→水，每一步需要沖洗不少于30個柱體積。
注意：不要輕易打開柱頭，因為柱頭一旦打開，很難恢復到新柱的水平，因為柱頭打開而造成的檢測后果，客戶自行負責。
