氮是蛋白質等有機材料中發現的五種主要元素之一，這一事實得到了化學家的認可，他用它來確定從各種生物中取出的樣品中的蛋白質含量。凱氏定氮儀用于確定含有銨鹽，硝酸鹽或有機氮化合物的物質混合物中的氮含量。該方法中使用的中心基礎是使用強硫酸氧化有機化合物。當有機材料被氧化時，它所含的碳被轉化為二氧化碳，氫被轉化為水。來自多肽鏈的肽鍵中發現的胺基的氮被轉化為銨離子，銨離子溶解在氧化溶液中，隨后可轉化為氨氣。
凱氏定氮儀是計算各種材料中蛋白質含量的標準，包括人類和動物食品，肥料，廢水和化石燃料。凱氏定氮方法包括三個步驟，必須按順序仔細執行，樣品首先在強硫酸中在催化劑存在下消化，這有助于胺氮轉化為銨離子，然后將銨離子轉化為氨氣，加熱并蒸餾。將氨氣引入捕集溶液中，使其溶解并再次成為銨離子，最后通過用標準溶液滴定來確定捕獲的氨的量，并進行計算。
步、消化
這是分析中最耗時的步驟，該步驟的目的是分解將多肽保持在一起的鍵，并將它們轉化為更簡單的化學物質，例如水，二氧化碳，當然還有氨。通過催化劑和中性物質如硫酸鉀的存在可以顯著加速這種反應，這提高了消化酸的沸點，從而提高了反應溫度。催化劑也用于幫助消化過程，已嘗試過許多不同的方法，包括硒，汞，銅或汞或銅離子。通過以下方式完成消化：
第二步、蒸餾
蒸餾的下一步驟的目的是將氨與消化混合物分離。這是通過，使用氫氧化鈉升高混合物的pH。這具有將銨離子改變為氣體氨的效果。通過蒸餾氨將氮氣從消化混合物中分離出來，然后將蒸餾的蒸汽捕集在70℃的約15mlHCl（鹽酸）的特殊捕集溶液中。毫升水。取出捕集瓶并用水沖洗冷凝器，以確保所有的氨都已溶解。
第三步、滴定
當氨溶解在酸捕集溶液中時，它會中和它在那里找到的一些HCl。然后可以回滴定剩余的酸，用標準的已知堿溶液滴定。以這種方式，可以計算從消化溶液中蒸餾出的氨的量，因此確定蛋白質中的氮的量。
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