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一. 共焦顯微鏡的類型:
1.點(diǎn)(慢)掃描共焦顯微鏡: 分辨率高, 圖像清晰;
噪音低;
采集圖像速度慢;
目鏡中觀察不到共焦圖像;
2.線(狹縫)掃描共焦 顯微鏡(video rate): 分辨率低;
噪音高;
掃描速度快 240幅/秒;
目鏡中可觀察到共焦圖像
3.Nipkov轉(zhuǎn)盤式掃描共焦顯微鏡: 性能介于上述兩者之間
功能:1.多熒光標(biāo)記樣品的圖像采集
2.無損傷、連續(xù)光學(xué)切片,顯微“CT”
3.真正的三維重組
4.假三維圖的顯示
5.可沿Z軸(xy平面)和Y軸(xz平面)方向進(jìn)行光切
6.定量分析
7.xyt 、xzt、xyzt 和 xt 掃描―― 時(shí)間序列掃描
8.圖像處理
9. 旋轉(zhuǎn)掃描
10.區(qū)域掃描
11.光譜掃描
二、激光掃描共焦顯微鏡技術(shù)的應(yīng)用
定位、定量
三維重組
動(dòng)態(tài)測(cè)量
*活細(xì)胞或組織內(nèi)游離Ca2+濃度的測(cè)量
*活細(xì)胞內(nèi)H+濃度( pH值)的測(cè)量
*自由基的檢測(cè)
*藥物進(jìn)入細(xì)胞的動(dòng)態(tài)過程、定位分布及定量
應(yīng)用:細(xì)胞膜電位的測(cè)量
熒光漂白恢復(fù)(FRAP)的測(cè)量
籠鎖解籠鎖的測(cè)量
熒光能量共振轉(zhuǎn)移(FRET)的測(cè)量