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質譜儀十點問題故障詳解

2023年06月17日 12:33:59      來源:北京帕莫瑞科技有限公司 >> 進入該公司展臺      閱讀量:32

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  質譜儀能用高能電子流等轟擊樣品分子,使該分子失去電子變為帶正電荷的分子離子和碎片離子。這些不同離子具有不同的質量,質量不同的離子在磁場的作用下到達檢測器的時間不同,其結果為質譜圖。
  質譜儀十點問題故障詳解
  01
  質譜不出峰的可能原因
  (1)進樣系統與離子源沒連接或有漏液
  (2)六通閥漏液
  (3)霧化氣沒開
  (4)噴霧電壓沒有
  (5)離子進入分析器的離子通道堵塞
  (6)噴霧毛細管堵塞
  02
  如何根據樣品選擇離子源
  可根據分子量的大小、極性。APCI適合小分子,極性小的化合物;ESI適合分析的分子量范圍較大、分子要求帶有一定極性。一般先考慮用ESI分析,如果極性實在太小,才想到用APCI。
  03
  等度還是梯度洗脫如何選擇
  其實只做一兩個化合物,是等度洗脫好,速度快,但也并非越快越好,特別在分析生物樣品時,考慮到基質效應,保留因子控制在2-3左右較好。梯度洗脫適合分析多個結構不同的物質,如化合物與代謝產物一同鑒定的時候,比如苷和苷元的一同測定。另外很多做合成化學的分析實驗室用的也是一通用的梯度洗脫方法,一個方法搞定大部分樣品。一般來說對于組成簡單的樣品可以采用等度洗脫,而對于那些復雜的樣品分離通常需要進行梯度洗脫。
  04
  氣質和液質系統對比
  除了采用的分離手段不同(氣相和液相)外主要的區別在于真空系統和電離方式。氣質的真空系統比較簡單,只要一個小的機械泵和一個分子渦輪泵就可以了。液質的機械泵要比氣質大,需要兩個分子渦輪泵。氣質的電離方式有電子電離(EI)和化學電離(CI)。液質的電離方式有電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)。
  05
  APCI和ESI的不同點
  (1)離子產生的方式不同。APCI利用電暈放電離子化,氣相離子化。ESI利用離子蒸發,液相離子化。
  (2)能被分析的化合物類型不同。APCI適合弱極性,小分子化合物,且具有一定的揮發性;ESI 極性化合物和生物大分子。
  (3)流速不同。ESI一般流速較小,約0.001到0.25 mL/min,APCI 相對較大,約0.2到2 mL/min。
  (4)多電荷。APCI不能生成一系列多電荷離子,所以不適合分析大分子;ESI 能生成一系列多電荷離子,特別適用于蛋白,多肽類等生物分子。
  06
  CID和CAD區別
  CID(collision-induced dissociation):
  碰撞誘導解離。通常在真空接口處調節電壓發生CID現象,一般是去除溶劑,如果電壓增大,也會產生碎片離子。這是一級質譜的原理。
  CAD(collision-activated dissociation):
  碰撞活化解離。做二級質譜時,選擇的母離子進入Q2后,碰撞活化產生子離子,這個過程稱為 CAD。
  以API3200譜儀為例,CID指的是Q0里面的誘導碰撞的氣體,CAD指的是Q3里面的誘導碰撞氣體。也就是說,在這里的CID&CAD都是指氮氣。
  07
  氮氣發生器該使用嗎
  氮氣發生器的工作原理是分離空氣,電解膜的負極側發生氧化反應,“吃掉”空氣中的氧化性氣體,在正極側還原,空氣流過電解池后就只剩下氮氣和惰性氣體。故國內發生器的純度大多標有“相對含氧量”。氮氣的純度和空氣流速、有效分解面的長度、電解電勢的強弱都有關系。這種分離方法也決定了氮氣的純度不可能做的很高。加入電解質的作用就是提高水的導電率,使電化學反應能順利進行。發生器對質譜的影響有一點常常被忽略,就是發生器內的開關電源工作時會對電網電壓造成一定的干擾(壓縮機的啟動和停止也會)。
  08
  串聯質譜如何定量
  串聯質譜定量時,是以后面產生的碎片峰(子離子)定量。但是這一子離子是由母離子在碰撞室產生的特征性碎片,所以用MRM定量靈敏度會比用SIM定量好很多。
  建立方法的步驟是:用一定溶度的標準品溶液(1-10 ug/mL)調諧化合物的一級質譜條件,找到母離子的質譜條件。然后對母離子進行打碎,優化碰撞能量,得到其特征性的子離子。最后利用該質譜條件和該母離子->子離子對進行定量。
  09
  質量偏差怎么辦
  質譜的質量數偏了,說明你的儀器該校正了,一般3個月就要校一次機。一般每個廠家都會隨機帶有校正液。
  10
  如何更換機械泵油
  一般3個月到半年更換一次泵油,可同時停機對儀器進行一次清洗。更換泵油的時候,先開啟振氣閥5-10分鐘,待將泵內沉淀振起后,關閉振氣閥,同時關閉電源。打開泵下的泵油排放閥門,放掉舊油。如果泵油已經很臟,則可取少許新油清洗泵后放掉再注入新油。
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