CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物，也是細(xì)胞所需成分，它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系。動(dòng)物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境，pH為7.2～7.4，以不超出6.8～7.6為宜。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，隨著CO2釋放量的增多，培養(yǎng)基會(huì)變酸，因此常加入NaHCO3（與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個(gè)緩沖對）來調(diào)節(jié)pH，以保持培養(yǎng)液中溶解的二氧化碳的濃度。同時(shí)細(xì)胞培養(yǎng)的器皿需要一定程度的透氣，以便于氣體的交換。
細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)箱一般為CO2培養(yǎng)箱，一是二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟取⒍趸紳舛群蜐穸忍峁┚_穩(wěn)定的控制，以便于其研究工作的進(jìn)展；二是二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進(jìn)行有效的防范，并且能夠定期消除污染，以保護(hù)研究成果，防止樣品損失。
是不是采用其他pH緩沖系統(tǒng)就不需要CO2培養(yǎng)箱了呢？
細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境一般是95%的空氣和5%的CO2。人們發(fā)現(xiàn)由于空氣中的二氧化碳濃度很低，如果細(xì)胞不在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的HCO3會(huì)被耗盡，這樣會(huì)影響細(xì)胞的正常生長。所以大部分動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，還是需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
為什么動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用CO2培養(yǎng)箱，植物細(xì)胞不用？
通常來說，CO2培養(yǎng)箱主要用來模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，例如提供適當(dāng)?shù)膒H值、溫度、濕度等。二氧化碳不僅是細(xì)胞生長的必需成分，還與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)，刺激細(xì)胞呼吸。植物體細(xì)胞可以在離體的情況下增值分化，對二氧化碳的要求不高，一般空氣中的濃度就可以滿足，只需保證空氣新鮮干凈即可。而動(dòng)物體細(xì)胞不行，所以動(dòng)物體細(xì)胞需要二氧化碳培養(yǎng)箱，而植物體細(xì)胞可以不使用二氧化碳培養(yǎng)箱。
網(wǎng)站客服
