多肽合成儀的功能操作
工作原理
肽合成儀采用固相合成作為反應原理。在密閉的防爆玻璃反應器中,按已知的順序(順序,一般是從C端到N端再到N-氨基端)不斷加入氨基酸并進行反應、合成、操作,*終得到多肽載體。固相合成法大大降低了每一步產品純化的難度。為了防止副反應的發生,參與反應的氨基酸的側鏈受到保護。羧基末端是游離的,必須在反應前活化。有兩種固相合成方法,即 Fmoc 和 tBoc。因為Fmoc相比tBoc有很多優勢,大部分都是用Fmoc的方法合成的,但是對于一些短肽來說,tBoc由于產量高的優勢還是被很多公司采用。
具體的合成包括以下循環:
1)脫保護:Fmoc保護的柱子和單體必須用堿性溶劑(哌 啶)脫去氨基的保護基。
2) 活化和交聯:下一個氨基酸的羧基被活化劑活化。活化的單體與游離氨基反應形成肽鍵。在這一步中,使用了大量的超濃縮試劑來推動反應完成。循環:兩步反應反復循環,直至合成完成。
3) 洗脫脫保護:肽從柱子上洗脫下來,其保護基通過脫保護劑(TFA)洗脫和脫保護。
基本組件
反應堆
數百年來,制藥工業中的反應器/反應器設備一直由玻璃制成。由于其透明性和耐腐蝕性,已被許多化學和生物專家使用。多肽合成過程需要操作人員直觀監控,合成后可在線切割(切割試劑TFA的強腐蝕性極大地限制了反應器的材質)。這些要求限制了反應器由玻璃制成。
玻璃料反應釜在制造工藝上有很大的難度限制:①燒成工藝:研磨精度,就像國內很多設備達不到要求,漏液和玻璃壁的均勻性等. . ②具有攪拌手柄和密封裝置的完整加工工藝 ③防爆處理
氨基酸儲罐
用于儲存氨基酸粉末或預活化的溶解氨基酸溶液。小型合成器的氨基酸儲罐數量一般在20-40個之間,以保證全自動縮合反應在無人看管的情況下順利進行。大型合成器根據生產規模有不同的配置。
溶劑儲罐
用于儲存多肽合成過程中所需的有機溶液,如DMF、PIP等。
量筒
用于測定氨基酸溶液和其他試劑的合成量。它需要一個精密傳感器來設計秤并將信息返回給計算機控制程序。由于早期的恒壓法偏差大,操作繁瑣,故采用此法進行測量。觸發器的數量取決于不同客戶的要求,不同品牌略有不同。
轉移瓶
傳感器
多端觸發自感應定量測量方法,直觀、科學、相對誤差*低。代替早期的恒壓法,避免了每天進行大量的數**算,運算更簡單,測量誤差值可控制在1%以內。
廢液桶
廢液桶通常是一個大的HDPE桶,以保證良好的通風。同時,需要安裝感應裝置,隨時檢測廢液,避免溢出。
控制配件
電磁閥