摘要：生物總黃酮是指黃酮類化合物，是一大類天然產物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分。在自然界中見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等。
目的建立中總黃酮的含量測定。方法色譜柱為KromasilC18；以甲醇水醋酸（45∶53∶2）為流動相；檢測波長359nm；外標法定量。結果總黃酮在0.0528～0.3168μg/μl范圍內呈良好的線性關系，Y=16714X-82.436，r=0.9994，平均回收率為96.19%，RSD=1.2%，（n=6）。結論所用方法簡便、靈敏、準確，可用于的質量控制。
是由紫花地丁、蒲公英、、半邊蓮4味藥材組成的中藥復方制劑，具有清熱解毒、利濕、退黃的功能。用于熱癤癰毒、咽喉腫痛、風熱火眼、濕熱黃疸等的治療。收載于《中國藥典》2005年版Ⅰ部［1］。測定采用HPLC法，以蘆丁為對照品，對中蒲公英的總黃酮進行了含量測定。方法簡便，重現性較好。
1儀器與試藥1.1儀器日本高效液相色譜系統（日本HITACHI系列）；UV757紫外可見分光光度計（上海精密科學儀器有限公司）；KQ-100A型（昆山市超聲儀器有限公司）；XS205DU電子天平（梅特勒-托利多）。
1.2試藥蘆丁對照品（中國生物制品檢定所）；由修正藥業集團股份有限公司提供，20g/袋，（批號：051005，053006，054003）；空白對照藥材購于東北大藥房錦州分店；甲醇：一級色譜純（天津市登峰化學試劑廠），水為雙蒸水，其他試劑均為分析純。
2方法與結果2.1色譜條件色譜柱為KromasilC18（5μm，4.6mm×250mm）；流動相為甲醇水醋酸（45∶53∶2）；流速：0.8ml/min；檢測波長359nm；進樣10μl；柱溫30℃；室溫操作。精密稱取蘆丁對照品0.1mg，用甲醇稀釋，溫熱溶解，并用甲醇定容至50ml容量瓶中，搖勻，使用UV757紫外分光光度計在200～500nm范圍內掃描，測得蘆丁在254nm，359nm處有兩個吸收峰，由于254nm雜質峰較大，而359nm則較小，且易分離，故選擇檢測波長為359nm。
2.2對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品13.2mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溫熱溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用。
2.3供試品溶液的制備取樣品，研細，精密稱定10.0g，置100ml具塞碘量瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30min。放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。取續濾液作為供試品溶液。取去蒲公英藥材的樣品，同法制備空白對照液。取上述溶液5.0ml置25ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。按上述色譜條件繪制三溶液的色譜圖見圖1～3。
2.4線性關系考察精密量取對照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml，置10ml容量瓶中加甲醇定容至刻度，搖勻，用液相色譜儀測定，進樣10μl，以進樣量與峰面積計算得回歸方程：Y=16714X-82.436，r=0.9994，表明總黃酮在0.0528～0.3168μg范圍內線性良好。
2.5精密度考察精密量取蘆丁對照品溶液（528μg·ml-1）10μl，重復進樣5次，按上述色譜條件測定，各次峰面積積分值的RSD=0.85%。
2.6重復性實驗取同一批號樣品（051005）5份，分別進行供試品溶液的制備，測定，同時取對照品溶液10μl進樣測定，按外標法計算含量，RSD=1.15%。
2.7加樣回收率實驗取已知含量的樣品（批號：051005）內容物10g，精密稱定，精密加入10ml蘆丁對照品溶液（0.528mg·ml-1），按照供試品溶液制備項下的制備方法，依法測定，計算回收率。結果見表1。表1回收率測定結果（略）
2.8樣品的含量測定精密吸取供試品溶液與對照品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，按外標法計算，測定結果見表2［2］。表2樣品含量測定結果（略）
3討論蘆丁的甲醇溶液經紫外分光光度計掃描，在254nm，359nm處有兩個吸收峰，由于254nm雜質峰較大，而359nm處則較小，且易分離，故選359nm作為檢測波長。
色譜條件在流動相的選擇過程中，選擇甲醇與水適量比例，反復實驗，使雜質峰與所測物質峰充分分離，加入適量酸，達到分離效果，定量更準確。
