【摘要】：獨(dú)腳金內(nèi)酯（SLs）具有刺激寄生植物種子萌發(fā)、促進(jìn)叢枝菌根真菌菌絲產(chǎn)生分枝, 直接或間接抑制植物側(cè)芽萌發(fā)和與寄主植物共生等諸多作用。其生理作用發(fā)揮與生長素和細(xì)胞分裂素有相互作用。植物激素亦稱植物天然激素或植物內(nèi)源激素。是指植物體內(nèi)產(chǎn)生的一些微量而能調(diào)節(jié)（促進(jìn)、抑制）自身生理過程的有機(jī)化合物。植物激素六項(xiàng)： 細(xì)胞分裂素（CTK）、 脫落酸（ABA）、 乙烯（ETH）赤霉素（G A） 、油菜素內(nèi)酯（BR）、吲哚乙酸（IAA）、獨(dú)腳金內(nèi)酯（SLs）。
檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被獨(dú)腳金內(nèi)酯（SLs）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的獨(dú)腳金內(nèi)酯（SLs）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法：
1. 樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。
3. 植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)。
4. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
試劑盒組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)以新版說明書為準(zhǔn)）
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 | 保存 |
微孔酶標(biāo)板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 2-8℃ |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 2-8℃ |
稀釋液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 2-8℃ |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物A | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
底物B | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
終止液 | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
封板膜 | 2張 | 2張 | 2-8℃ |
說明書 | 1份 | 1份 | 2-8℃ |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 2-8℃ |
注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。
試劑盒性能：
1. 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度：1.0 ng/mL。
3. 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6個(gè)月
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